產(chǎn)品概述:產(chǎn)品參數(shù) 外觀:可溶于 DMSO 的白色或淺黃色固體 CAS 號(hào):150347-59-4 Ex/Em:494/521 nm(pH=7) 分子式:C29H19NO11 分子量:557.47 儲(chǔ)存條件 -20℃ 避光保存,有效期見外包裝。 產(chǎn)品介紹 5(6)-CFDA, SE 是一種可對活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞示蹤染料,不僅可用于細(xì)胞增殖的體外實(shí)驗(yàn),還可用于追蹤細(xì)胞在體內(nèi)的分裂增殖過程。 5(6)-CFDA, SE 是二乙酸熒光素(Fluorescein diacetate,F(xiàn)DA)的衍生物,具有細(xì)胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluoresceinsuccinimidyl ester,CFSE),可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光,不能穿透細(xì)胞膜,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE 還可自發(fā)并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上,同時(shí)過量且未被偶聯(lián)的 5(6)-CFDA, SE通過被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月,因此非常適用于細(xì)胞群落分析。 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如 PKH 26,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也很均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中,熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀(FL1 通道)根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同,可檢測出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2 的熒光強(qiáng)度),二次(1/4 的熒光強(qiáng)度),三次(1/8 的熒光強(qiáng)度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。5(6)-CFDA, SE 可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng) 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究 ,且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能 。5(6)-CFDA, SE 最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測,也可用于成纖維細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞,造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。 5(6)-CFDA, SE 標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外,還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目,或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。注意事項(xiàng) 1. 5(6)-CFDA, SE 與胺基反應(yīng),所以實(shí)驗(yàn)過程中不可使用含胺的緩沖液。 2. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 3. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
說明書:UE-C4070 常見問題解答:◆細(xì)胞追蹤有很多產(chǎn)品,該如何選擇?首先確定追蹤細(xì)胞的時(shí)間,然后考慮染料結(jié)合機(jī)制。1.鈣黃綠素染料(C4041)標(biāo)記均勻且對短期細(xì)胞遷移示蹤效果極佳,但也會(huì)被某些類型細(xì)胞迅速外排。2.親脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能標(biāo)記細(xì)胞膜而不破壞其功能,并且能持續(xù)更長時(shí)間,但如果發(fā)生膜融合則可能會(huì)染上其他細(xì)胞。此外,它們還會(huì)在透化過程中丟失。3.CellTracker染料(C4060)更有利于長期標(biāo)記,其帶有溫和的氯甲基反應(yīng)基團(tuán)使之能夠與細(xì)胞組分共價(jià)結(jié)合。4.CFDA SE(C4070)也能共價(jià)地結(jié)合于細(xì)胞組分。在所有列出的試劑中,細(xì)胞內(nèi)保留與否取決于細(xì)胞分裂的速率和細(xì)胞的固有特性(主動(dòng)外排,膜和蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)率等)。其中共價(jià)結(jié)合試劑比非共價(jià)結(jié)合的試劑展現(xiàn)出更長的保留時(shí)間 ◆CFDA SE能否用于干細(xì)胞的增殖檢測?CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒可以用于各種常見細(xì)胞的增殖和示蹤檢測,包括干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等◆稱量粉末的時(shí)候需要避光嗎?建議避光的◆該產(chǎn)品是無菌的嗎?是粉末,用DMSO配制母液,不需要做過濾除菌
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):參考文獻(xiàn)1.5,6-carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester-labeled apoptotic and necrotic as well as detergent-treated cells can be traced in composite cell samples.應(yīng)用方向:除追蹤活細(xì)胞外,還可以用來追蹤復(fù)合樣本中的死亡細(xì)胞2.Vascularized organoid engineered by modular assembly enables blood perfusion應(yīng)用方向:標(biāo)記HepG2細(xì)胞進(jìn)行共培養(yǎng)3.Decreased proliferative capability of CD4(+) cells of elderly people is associated with faster loss of activation-related antigens and accumulation of regulatory T cells.應(yīng)用方向:染色組織塊上采集的靜脈血中分離出的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)4.Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.應(yīng)用方向:對原發(fā)性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤T3590進(jìn)行標(biāo)記5.Deletion of a coordinate regulator of type 2 cytokine expression in mice.應(yīng)用方向:標(biāo)記CD4+T細(xì)胞
6.Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subseqUEnt quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry.應(yīng)用方向:使用CFSE進(jìn)行標(biāo)記的外泌體可以用于后續(xù)FACS、NTA和顯微鏡觀察使用