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螞蟻淘/YF<sup>?</sup>488 Click-iT EdU成像試劑盒（綠色熒光）/500T/C6015L
  • 螞蟻淘/YF<sup>?</sup>488 Click-iT EdU成像試劑盒（綠色熒光）/500T/C6015L

螞蟻淘/YF?488 Click-iT EdU成像試劑盒（綠色熒光）/500T/C6015L

價格: ￥1621.00 市場價: 2701.67
貨號: C6015L
品牌: ebiomall
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    • 產(chǎn)品概述：儲存條件-20℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。

      組分

      規(guī)格

      20T

      100T

      500T

      1000T

      開封后保存溫度

      穩(wěn)定性

      A.10 mM EdU

      40 μL

      0.2 mL

      1 mL

      2×1mL

      -20℃

      開封后按指定溫度保存可有效放置一年

      B.YF? 488/555/594/647A Azide

      4 μL

      20 μL

      100 μL

      200 μL

      -20℃，避光

      C.10× Click-iT EdU反應(yīng)緩沖液

      200 μL

      1 mL

      5 mL

      10 mL

      2-8℃

      D.CuSO4

      100 μL

      0.5 mL

      2×1.25 mL

      5 mL

      2-8℃

      E.Click-iT EdU緩沖液添加物

      6 mg

      30 mg

      150 mg

      2 × 150 mg

      2-8℃

      F.Hoechst 33342

      5 μL

      25 μL

      125 μL

      250 μL

      2-8℃

      規(guī)格：上述反應(yīng)次數(shù)針對96孔板培養(yǎng)的細胞，不同容器的具體用量可參考附表1。

      熒光光譜數(shù)據(jù)：YF? 488 Azide：495/519 nm；YF? 555 Azide：555/565 nm；YF?594 Azide：590/617 nm

      YF? 647A Azide：650/670 nm；Hoechst 33342：350/461 nm（bound to DNA）

      產(chǎn)品介紹細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。檢測細胞增殖最精確的方法是 BrdU 法。EdU 法檢測試劑盒是 BrdU 法的革命性突破。EdU（5-乙炔基-2’-脫氧尿苷）是一種嘧啶類似物，在 DNA 合成期整合入 DNA 雙鏈。EdU 法檢測基于“點擊”反應(yīng)，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴作用發(fā)生共價反應(yīng)，形成共價鍵。本試劑盒中，EdU 含有炔烴，YF? 488/555/647A Azide 染料含有疊氮化合物。點擊法的 EdU 標(biāo)記增殖快速有效，易于使用。BrdU 方法需要 DNA 變性（如酸變性、熱變性或者用 DNase 消化）暴露出 BrdU，從而方便 BrdU 抗體結(jié)合；而EdU 法只需標(biāo)準(zhǔn)化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促滲就可以使檢測試劑進入細胞，只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標(biāo)記出整合的 EdU。本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組分，可以用于體外培養(yǎng)細胞的增殖檢測。
      說明書：UE-C6015S/C6015M/C6015L/C6015XL
      MSDS：MSDS C6015 YF?488 Click-iT EdU Imaging Kits
      常見問題解答：◆YF?488/555/594/647有什么區(qū)別？

      主要就是檢測EDU的物質(zhì)帶的熒光基團不同，檢測時發(fā)射熒光的顏色不同。實驗效果相同，可根據(jù)偏好或需求進行選擇。◆EdU試劑盒中，固定后3% BSA in PBS的作用是什么？清洗步驟中，BSA可以終止掉未反應(yīng)的甲醛。◆能否在活細胞中進行Click-iT EdU檢測？不可以。雖然EdU是對活細胞進行代謝標(biāo)記，但是疊氮化物檢測試劑和緩沖液組分是細胞非透過型，檢測信號時的Click反應(yīng)必須在固定和通透的樣品上進行。◆質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達的熒光蛋白檢測與Click反應(yīng)兼容嗎？檢測順序是什么？本產(chǎn)品會影響GFP、RFP、mCherry等熒光蛋白的熒光，故染色后無法直接檢測GFP，建議使用GFP抗體間接檢測。◆觀測到較高的本底干擾，這是什么原因所致？如何減少本底干擾？疊氮化物和炔烴類間Click反應(yīng)非常有選擇性，生物體內(nèi)幾乎不可能有副反應(yīng)發(fā)生，所以本底較高一般是由洗滌不充分造成的。減少本底干擾的最佳方法是增加BSA洗滌的次數(shù)。同時，也可在同樣的檢測條件下設(shè)置一組同等處理的無染料或無Click反應(yīng)對照，以排除自發(fā)熒光干擾。此外，您還可在無EdU 體系中進行完整的Click反應(yīng)，驗證Click反應(yīng)信號的特異性。◆為什么標(biāo)記樣品無信號或特異性信號非常低？如何提高信號？1.請保證試劑使用時為無色的狀態(tài)，不要使用已經(jīng)變黃的添加劑或緩沖液；2.為確保Click反應(yīng)試劑能夠到達核內(nèi)，細胞需要充分地固定和通透；3.由于銅離子能結(jié)合到部分試劑上，這會導(dǎo)致催化Click反應(yīng)的有效濃度降低。所以在Click反應(yīng)前，不要在任何緩沖液或試劑中引入金屬螯合劑（例如EDTA、EGTA、檸檬酸鹽等），對某些含有這些物質(zhì)的實驗樣品來說，進行Click反應(yīng)前，可能需要增加額外的洗滌步驟；4.當(dāng)銅離子在合適的化合價時，Click反應(yīng)才有效。Click反應(yīng)中用到的銅離子為二價銅(Cu2+)。5.延長Click反應(yīng)的時間至超過30分鐘也并不會提高信號。建議使用新鮮的Click反應(yīng)試劑再次進行30分鐘的孵育，可更有效地提高標(biāo)記效率。◆如何對細胞核進行復(fù)染？試劑盒中配有Hoechst 33342，可以在Click反應(yīng)后用于細胞核的染色，也可選擇使用DAPI。◆可以用于檢測植物細胞核內(nèi)的DNA復(fù)制嗎?可以。EdU是小分子，可以穿透植物細胞的細胞壁。

      使用本產(chǎn)品的文獻：參考文獻1.A rapid and robust assay for detection of S-phase cell cycle progression in plant cells and tissUEs by using ethynyl deoxyuridine應(yīng)用方向：植物細胞2.A rapid non-radioactive techniqUE for measurement of repair synthesis in primary human fibroblasts by incorporation of ethynyl deoxyuridine (EdU)應(yīng)用方向：DNA修復(fù)3.Chick Embryo Proliferation Studies Using EdU Labeling應(yīng)用方向：EdU（動物）細胞增殖檢測4.Visualization of Mitochondrial DNA Replication in Individual Cells by EdU Signal Amplification應(yīng)用方向：線粒體活性檢測5.A method for evaluating the host range of bacteriophages using phages fluorescently labeled with 5-ethynyl-2′-deoxyuridine (EdU)應(yīng)用方向：細胞成像&細胞流式6.Human cytomegalovirus UL44 concentrates at the periphery of replication compartments, the site of viral DNA synthesis應(yīng)用方向：病毒活性檢測7.Labeling and Tracking of Mesenchymal Stem Cells with EdU應(yīng)用方向：細胞標(biāo)記示蹤
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