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螞蟻淘/YF<sup>?</sup>594 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒（紅色熒光）/50T/C6021L
  • 螞蟻淘/YF<sup>?</sup>594 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒（紅色熒光）/50T/C6021L

螞蟻淘/YF?594 Click-iT EdU 流式檢測試劑盒（紅色熒光）/50T/C6021L

價格: ￥2947.00 市場價: 4911.67
貨號: C6021L
品牌: ebiomall
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    • 產(chǎn)品概述：產(chǎn)品內(nèi)容 組分 5T20T50T保存溫度穩(wěn)定性A. 10 mM EdU100 μL0.4 mL1 mL-20℃按指定溫度保存可有效放置一年B. YF? 488/555/594/647A Azide25 μL100 μL250 μL-20℃，避光C. 10× Click-iT EdU 反應(yīng)緩沖液500 μL2×1 mL5 mL2-8℃D. CuSO4200 μL0.8 mL2× 1 mL2-8℃E. Click-iT EdU 緩沖液添加物15 mg60 mg150 mg2-8℃儲存條件 -20℃ 避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。產(chǎn)品介紹 細胞增殖檢測是評估細胞健康程度、遺傳毒性及抗腫瘤藥物效果的基礎(chǔ)實驗手段。檢測細胞增殖最精確的方法是 BrdU 法。EdU 法檢測試劑盒是BrdU法的革命性突破。EdU （5-乙炔基-2’-脫氧尿苷）是一種嘧啶類似物，在 DNA 合成期整合入 DNA 雙鏈。EdU 法檢測基于“點擊”反應(yīng)，一種由銅催化的疊氮化合物和炔烴作用發(fā)生共價反應(yīng)，形成共價鍵。 本試劑盒中，EdU 含有炔烴，YF?488/555/647A Azide 染料含有疊氮化合物。點擊法的 EdU 標記增殖快速有效，易于使用。BrdU 方法需要 DNA 變性（如酸變性、熱變性或者用 DNase 消化）暴露出 BrdU，方便 BrdU 抗體結(jié)合；而 EdU 法只需標準化的多聚甲醛固定和 Triton X-100 促滲就可以使檢測試劑進入細胞，只需少量的疊氮化染料即可非常有效地標記出整合的 EdU。本試劑盒包含EdU法檢測所需要的所有組分，可以用于體外培養(yǎng)細胞的增殖檢測。
      說明書：UE-C6021S/C6021M/C6021L
      常見問題解答：

      ◆YF?488/555/594/647有什么區(qū)別？

      主要就是檢測EDU的物質(zhì)帶的熒光基團不同，檢測時發(fā)射熒光的顏色不同。實驗效果相同，可根據(jù)偏好或需求進行選擇。◆EdU試劑盒中，固定后3% BSA in PBS的作用是什么？清洗步驟中，BSA可以終止掉未反應(yīng)的甲醛。◆能否在活細胞中進行Click-iT EdU檢測？不可以。雖然EdU是對活細胞進行代謝標記，但是疊氮化物檢測試劑和緩沖液組分是細胞非透過型，檢測信號時的Click反應(yīng)必須在固定和通透的樣品上進行。◆質(zhì)粒轉(zhuǎn)染表達的熒光蛋白檢測與Click反應(yīng)兼容嗎？檢測順序是什么？本產(chǎn)品會影響GFP、RFP、mCherry等熒光蛋白的熒光，故染色后無法直接檢測GFP，建議使用GFP抗體間接檢測。◆觀測到較高的本底干擾，這是什么原因所致？如何減少本底干擾？疊氮化物和炔烴類間Click反應(yīng)非常有選擇性，生物體內(nèi)幾乎不可能有副反應(yīng)發(fā)生，所以本底較高一般是由洗滌不充分造成的。減少本底干擾的最佳方法是增加BSA洗滌的次數(shù)。同時，也可在同樣的檢測條件下設(shè)置一組同等處理的無染料或無Click反應(yīng)對照，以排除自發(fā)熒光干擾。此外，您還可在無EdU 體系中進行完整的Click反應(yīng)，驗證Click反應(yīng)信號的特異性。◆為什么標記樣品無信號或特異性信號非常低？如何提高信號？1.請保證試劑使用時為無色的狀態(tài)，不要使用已經(jīng)變黃的添加劑或緩沖液；2.為確保Click反應(yīng)試劑能夠到達核內(nèi)，細胞需要充分地固定和通透；3.由于銅離子能結(jié)合到部分試劑上，這會導致催化Click反應(yīng)的有效濃度降低。所以在Click反應(yīng)前，不要在任何緩沖液或試劑中引入金屬螯合劑（例如EDTA、EGTA、檸檬酸鹽等），對某些含有這些物質(zhì)的實驗樣品來說，進行Click反應(yīng)前，可能需要增加額外的洗滌步驟；4.當銅離子在合適的化合價時，Click反應(yīng)才有效。Click反應(yīng)中用到的銅離子為二價銅(Cu2+)。5.延長Click反應(yīng)的時間至超過30分鐘也并不會提高信號。建議使用新鮮的Click反應(yīng)試劑再次進行30分鐘的孵育，可更有效地提高標記效率。◆如何對細胞核進行復染？試劑盒中配有Hoechst 33342，可以在Click反應(yīng)后用于細胞核的染色，也可選擇使用DAPI。◆可以用于檢測植物細胞核內(nèi)的DNA復制嗎?可以。EdU是小分子，可以穿透植物細胞的細胞壁。
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