產品概述:儲存條件4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。 組分 | 24T | 48T | 96T | 使用方法 | 開封后保存條件 |
A.標準品 | 2000 pg | 2000 pg | 2×2000 pg | 按說明書進行稀釋 | -20℃可存放一月 |
B.標準稀釋液 | 16 mL | 2×16 mL | 4×16 mL | 即用型 | 4℃可存放一月 |
C.濃縮生物素化抗體(100×) | 30 μL | 60 μL | 2×60 μL | 按說明書進行稀釋 (現(xiàn)配現(xiàn)用) |
D.生物素化抗體稀釋液 | 16 mL | 16 mL | 16 mL | 即用型 |
E.濃縮酶結合物(避光100×) | 30 μL | 60 μL | 2×60 μL | 按說明書進行稀釋 (現(xiàn)配現(xiàn)用) |
F.酶結合物稀釋液 | 16 mL | 16 mL | 16 mL | 即用型 |
G.濃縮洗滌液(20×) | 16 mL | 16 mL | 25mL | 即用型 |
H.顯色劑(避光) | 6 mL | 6 mL | 12mL | 即用型 |
I.終止液 | 12mL | 12mL | 12mL | 即用型 | 4℃或常溫保存 |
J.預包被96孔板 | 8×3 | 8×6 | 8×12 | 即用型 | 密封干燥4℃保存 |
K.封板膠紙 | 1張 | 2張 | 4張 | 即用型 |
注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。產品介紹Human Adiponectin ELISA Kit (Human Adiponectin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 Adiponectin 濃度。脂聯(lián)素 (Adiponectin) ,又稱 30 kD 脂肪細胞因子(Adipocyte Complement-Related Protein,Acrp 30),adipoQ,脂肪組織特有基因 (Adipose Most Abundant Gene Transcript1,apM 1)、或 28 KD 凝膠結合蛋白 (Gelatin-Binding Protein28,GBP 28),是由脂肪細胞分泌的一種特異性蛋白,主要參與維持體內葡萄糖-脂質平衡,循環(huán)脂聯(lián)素濃度相對較高,約占血漿總蛋白的 0.01%。脂聯(lián)素 N 端含有膠原蛋白樣結構域,C 端具有球狀結構域,其中包含一段與補體因子 C1q極為相似的序列和結構,屬于可溶性膠原超家族,與膠原Ⅷ、Χ、補體 C1q 和腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor,TNF)家族具有結構同源性。脂聯(lián)素可形成三聚體、六聚體和更大分子量的低聚體復合物,復合物的類型不同會影響脂聯(lián)素的生物活性。在脂肪細胞分化或受到胰島素刺激時細胞會產生脂聯(lián)素。脂聯(lián)素有 AdipoR 1 和 AdipoR 2 兩個受體,其中AdipoR 1 在骨骼肌中表達量高,AdipoR 2 則主要在肝組織中表達。將一定劑量的脂聯(lián)素注入非肥胖無糖尿病的正常小鼠體內,會導致其體內胰島素非依賴性的葡萄糖水平降低,這表明脂聯(lián)素可作為胰島素敏感激素,調節(jié)甘油三酯代謝。除了正常脂聯(lián)素外,血液中還存在一種僅含 C 末端球狀結構的短脂聯(lián)素 (gAdiponectin),這種脂聯(lián)素可以使小鼠肌肉和肝臟的重量下降,和游離脂肪酸過氧化效果一樣,調節(jié)效果明顯優(yōu)于正常脂質素。短脂聯(lián)素脂質過氧化中的作用可能是通過對甘油三酯代謝相關蛋白的表達和活性調控,如 CD36,acyl CoA oxidase,AMPK 和 PPARγ。肥胖和循環(huán)脂質素間有明確的負相關關系,脂聯(lián)素水平隨著體重下降而升高。脂聯(lián)素水平下降和胰島素抵抗,胰島素過多相關,Ⅱ型糖尿病患者體內的循環(huán)脂聯(lián)素水平下降。胰島素敏感素,抗糖尿病藥噻唑霉素能提高胰島素抵抗患者體內的脂聯(lián)素水平,脂聯(lián)素水平增高會有效降低Ⅱ型糖尿病發(fā)病風險。核磁共振(光譜)分析表明人肌肉細胞內脂肪含量和脂聯(lián)素水平負相關,這可能是由于脂聯(lián)素可誘導脂肪酸過氧化造成的。脂聯(lián)素還在抗動脈粥樣硬化和抗炎癥方面起作用,在冠心病患者血漿中脂聯(lián)素水平會下降。脂聯(lián)素可通過體外抑制內皮細胞粘附分子的表達,抑制單核細胞的附著。另外,脂聯(lián)素可負調控粒單系細胞生長和巨噬細胞中TNF-a 的產生。
本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中人Adiponectin 濃度。在人 Adiponectin 單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品,其中的 Adiponectin 會與其單抗結合,洗去游離成分;加入生物素化的抗人Adiponectin 抗體,抗人 Adiponectin 抗體與結合在單抗上的人 Adiponectin 結合而形成免疫復合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標記的親合素,生物素與親合素特異性結合,洗去未結合的酶結合物;加入顯色劑,若反應孔中有Adiponectin,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值,人 Adiponectin濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 Adiponectin 濃度。
注意事項a.稀釋后的標準品不可重復使用,未用完的標準品分裝,于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。b. 濃縮生物素化抗體、濃縮酶結合物稀釋前請先離心處理,使管內液體沉入底部。c. 不同批號試劑不可混用。d. 混勻要充分,最好使用微量振蕩器(用最低頻率進行震蕩)。