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螞蟻淘/人脂聯(lián)素 ELISA試劑盒(Human Adiponectin ELISA KIT)/48T/H6123M
  • 螞蟻淘/人脂聯(lián)素 ELISA試劑盒(Human Adiponectin ELISA KIT)/48T/H6123M

螞蟻淘/人脂聯(lián)素 ELISA試劑盒(Human Adiponectin ELISA KIT)/48T/H6123M

價格: ¥1587.00 市場價: 2645.00

貨號: H6123M
品牌: ebiomall
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  • 使用說明
  • 常見問題
    • 產(chǎn)品概述:儲存條件4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標(biāo)準(zhǔn)品

      2000 pg

      2000 pg

      2×2000 pg

      按說明書進(jìn)行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標(biāo)準(zhǔn)稀釋液

      16 mL

      2×16 mL

      4×16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體(100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進(jìn)行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進(jìn)行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      F.酶結(jié)合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液(20×)

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑(避光)

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預(yù)包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。產(chǎn)品介紹Human Adiponectin ELISA Kit (Human Adiponectin Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即人脂聯(lián)素酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,可以定量檢測人血清、血漿或細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 Adiponectin 濃度。脂聯(lián)素 (Adiponectin) ,又稱 30 kD 脂肪細(xì)胞因子(Adipocyte Complement-Related Protein,Acrp 30),adipoQ,脂肪組織特有基因 (Adipose Most Abundant Gene Transcript1,apM 1)、或 28 KD 凝膠結(jié)合蛋白 (Gelatin-Binding Protein28,GBP 28),是由脂肪細(xì)胞分泌的一種特異性蛋白,主要參與維持體內(nèi)葡萄糖-脂質(zhì)平衡,循環(huán)脂聯(lián)素濃度相對較高,約占血漿總蛋白的 0.01%。脂聯(lián)素 N 端含有膠原蛋白樣結(jié)構(gòu)域,C 端具有球狀結(jié)構(gòu)域,其中包含一段與補體因子 C1q極為相似的序列和結(jié)構(gòu),屬于可溶性膠原超家族,與膠原Ⅷ、Χ、補體 C1q 和腫瘤壞死因子 (tumor necrosis factor,TNF)家族具有結(jié)構(gòu)同源性。脂聯(lián)素可形成三聚體、六聚體和更大分子量的低聚體復(fù)合物,復(fù)合物的類型不同會影響脂聯(lián)素的生物活性。在脂肪細(xì)胞分化或受到胰島素刺激時細(xì)胞會產(chǎn)生脂聯(lián)素。脂聯(lián)素有 AdipoR 1 和 AdipoR 2 兩個受體,其中AdipoR 1 在骨骼肌中表達(dá)量高,AdipoR 2 則主要在肝組織中表達(dá)。將一定劑量的脂聯(lián)素注入非肥胖無糖尿病的正常小鼠體內(nèi),會導(dǎo)致其體內(nèi)胰島素非依賴性的葡萄糖水平降低,這表明脂聯(lián)素可作為胰島素敏感激素,調(diào)節(jié)甘油三酯代謝。除了正常脂聯(lián)素外,血液中還存在一種僅含 C 末端球狀結(jié)構(gòu)的短脂聯(lián)素 (gAdiponectin),這種脂聯(lián)素可以使小鼠肌肉和肝臟的重量下降,和游離脂肪酸過氧化效果一樣,調(diào)節(jié)效果明顯優(yōu)于正常脂質(zhì)素。短脂聯(lián)素脂質(zhì)過氧化中的作用可能是通過對甘油三酯代謝相關(guān)蛋白的表達(dá)和活性調(diào)控,如 CD36,acyl CoA oxidase,AMPK 和 PPARγ。肥胖和循環(huán)脂質(zhì)素間有明確的負(fù)相關(guān)關(guān)系,脂聯(lián)素水平隨著體重下降而升高。脂聯(lián)素水平下降和胰島素抵抗,胰島素過多相關(guān),Ⅱ型糖尿病患者體內(nèi)的循環(huán)脂聯(lián)素水平下降。胰島素敏感素,抗糖尿病藥噻唑霉素能提高胰島素抵抗患者體內(nèi)的脂聯(lián)素水平,脂聯(lián)素水平增高會有效降低Ⅱ型糖尿病發(fā)病風(fēng)險。核磁共振(光譜)分析表明人肌肉細(xì)胞內(nèi)脂肪含量和脂聯(lián)素水平負(fù)相關(guān),這可能是由于脂聯(lián)素可誘導(dǎo)脂肪酸過氧化造成的。脂聯(lián)素還在抗動脈粥樣硬化和抗炎癥方面起作用,在冠心病患者血漿中脂聯(lián)素水平會下降。脂聯(lián)素可通過體外抑制內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子的表達(dá),抑制單核細(xì)胞的附著。另外,脂聯(lián)素可負(fù)調(diào)控粒單系細(xì)胞生長和巨噬細(xì)胞中TNF-a 的產(chǎn)生。

      本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中人Adiponectin 濃度。在人 Adiponectin 單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,其中的 Adiponectin 會與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗人Adiponectin 抗體,抗人 Adiponectin 抗體與結(jié)合在單抗上的人 Adiponectin 結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有Adiponectin,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍(lán)色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值,人 Adiponectin濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中人 Adiponectin 濃度。

      注意事項a.稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品不可重復(fù)使用,未用完的標(biāo)準(zhǔn)品分裝,于-20℃或-80℃凍存,避免反復(fù)凍融。b. 濃縮生物素化抗體、濃縮酶結(jié)合物稀釋前請先離心處理,使管內(nèi)液體沉入底部。c. 不同批號試劑不可混用。d. 混勻要充分,最好使用微量振蕩器(用最低頻率進(jìn)行震蕩)。

      說明書:UE-H6123S/H6123M/H6123L
      常見問題解答:◆背景信號強是什么原因?1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確??讌^(qū)域洗滌充分;確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液;增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度,在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液;延長封閉時間。4.孵育時間過長。縮短孵育時間。5.樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中含干擾物質(zhì)。設(shè)置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

      ◆沒有信號?1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復(fù)實驗;檢查試劑配制方法;復(fù)核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量;增加抗體用量(濃度)。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復(fù)溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍(lán)色?1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴(yán)格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預(yù)混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復(fù)使用導(dǎo)致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標(biāo)準(zhǔn)曲線差?1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標(biāo)板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴(yán)格按照說明書操作流程。6.標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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