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螞蟻淘/人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子ELISA試劑盒（Human GM-CSF ELISA KIT）/24T/H6124S

價格: ￥952.00 市場價: 1586.67

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貨號: H6124S

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- 產(chǎn)品概述：
  產(chǎn)品內(nèi)容
  組分
  24T
  48T
  96T
  使用方法
  開封后保存條件
  A.標準品
  2000 pg
  2000 pg
  2×2000 pg
  按說明書進行稀釋
  -20℃可存放一月
  B.標準稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  4℃可存放一月
  C.濃縮生物素化抗體（100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  D.生物素化抗體稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  E.濃縮酶結(jié)合物（避光100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  F.酶結(jié)合物稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  G.濃縮洗滌液（20×）
  16 mL
  16 mL
  25mL
  即用型
  H.顯色劑（避光）
  6 mL
  6 mL
  12mL
  即用型
  I.終止液
  12mL
  12mL
  12mL
  即用型
  4℃或常溫保存
  J.預包被96孔板
  8×3
  8×6
  8×12
  即用型
  密封干燥4℃保存
  K.封板膠紙
  1張
  2張
  4張
  即用型
  注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
  
  儲存條件 4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。產(chǎn)品介紹 Human GM-CSF ELISA Kit (Human Granulocyte- Macrophage Colony Stimulating Factor Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子 ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 GM-CSF 濃度。粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子 (granulocytemacrophage colony stimulating factor, GM-CSF)，又稱 CSF-2，是一種分子量 30kDa 的多效性細胞因子。人 GM-CSF 前體蛋白由 144 個氨基酸殘基組成，包含 17 氨基酸的先導序列，成熟的人 GM-CSF 分子由 127 個氨基酸殘基組成，以單體形式存在。成熟的人 GM-CSF 在氨基酸水平與小鼠，大鼠和豬分別有 55％，63%和 68%的同源性。人與小鼠 GM-CSF 沒有交叉的生物學活性，與豬 GM-CSF 有交叉的生物學活性。GM-CSF 主要是通過與高親和力的受體復合物結(jié)合發(fā)揮生物學效應(yīng)。IL-3 受體 (IL-3R)結(jié)合發(fā)揮生物學效應(yīng)。人和小鼠 GM-CSFR 均由α、β兩條鏈組成，單獨α鏈與配體的結(jié)合為低親合力，β鏈單獨不結(jié)合配體，但與α鏈共同組成高親和力受體，在信號轉(zhuǎn)導中起主要作用。GM-CSFR α、β兩條鏈胞膜外結(jié)構(gòu)均屬于造血因子受體超家族（紅細胞生成素受體超家族）成員。GM-CSFR β鏈為 IL-3、IL-5 受體所共用。T 細胞、B 細胞、NK、巨核細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞、肥大細胞、內(nèi)皮細胞、單核細胞、肺泡Ⅱ型上皮細胞、嗜酸細胞、軟骨細胞和成纖維細胞等均可產(chǎn)生 GM-CSF。作為造血因子中的重要一員，GM-CSF 具有多種生物學活性，可刺激骨髓細胞，粒細胞，巨噬細胞祖細胞，紅樣，巨核細胞祖細胞，AML，白血病細胞系，內(nèi)皮細胞增殖；促進造血；活化中性粒細胞促進 ADCC，氧化代謝，脫顆粒和細胞因子的分泌；降低血清膽固醇等。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中人 GM-CSF 濃度。在人 GM-CSF 單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 GM-CSF 會與其單抗結(jié)合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人 GM-CSF 抗體，抗人 GM-CSF 抗體與結(jié)合在單抗上的人 GM-CSF 結(jié)合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物；加入顯色劑，若反應(yīng)孔中有 GM-CSF，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，人 GM-CSF 濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 GM-CSF 濃度。
  說明書：UE-H6124S/H6124M/H6124L
  常見問題解答：◆背景信號強是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時間。4.孵育時間過長?？s短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質(zhì)。設(shè)置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。
  ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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