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螞蟻淘/人γ干擾素ELISA試劑盒（Human IFN-γ ELISA KIT）/24T/H6125S

價格: ￥952.00 市場價: 1586.67

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貨號: H6125S

品牌: ebiomall

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詳情
使用說明
常見問題

- 產(chǎn)品概述：儲存條件 4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。
  組分
  24T
  48T
  96T
  使用方法
  開封后保存條件
  A.標準品
  4000 pg
  4000 pg
  2×4000 pg
  按說明書進行稀釋
  -20℃可存放一月
  B.標準稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  4℃可存放一月
  C.濃縮生物素化抗體（100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  D.生物素化抗體稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  E.濃縮酶結(jié)合物（避光100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  F.酶結(jié)合物稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  G.濃縮洗滌液（20×）
  16 mL
  16 mL
  25mL
  即用型
  H.顯色劑（避光）
  6 mL
  6 mL
  12mL
  即用型
  I.終止液
  12mL
  12mL
  12mL
  即用型
  4℃或常溫保存
  J.預包被96孔板
  8×3
  8×6
  8×12
  即用型
  密封干燥4℃保存
  K.封板膠紙
  1張
  2張
  4張
  即用型
  注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗
  產(chǎn)品介紹 Human IFN-γ ELISA Kit (Human Interferon-γ Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即人γ干擾素 ELISA 試劑盒，可以定量檢測人血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IFN-γ濃度。γ干擾素也稱為Ⅱ型干擾素，是細胞因子超家族中 IFN 家族的重要成員，具有廣泛的生物學功能，如抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、調(diào)控細胞增殖和分化等。人 IFN-γ基因定位于第 12 號染色體，在 DNA 水平上 IFN-γ基因與 IFN-α/β基因無同源性。成熟的人 IFN-γ分子是由 143 個氨基酸組成的分泌型糖蛋白，以同源二聚體形式存在，分子量為 40 kDa，其生物學作用有嚴格的種屬特異性。人 IFN-γR 基因定位于第 6 號染色體。IFN-γR 為跨膜糖蛋白，胞膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)分別有 228、21 和 223 個氨基酸殘基，從胞膜外區(qū)結(jié)構(gòu)特征來看，屬于細胞因子受體、干擾素受體家族，最近命名為 CDw119。IFN-γ與受體結(jié)合后可活化多種 IFN-γ調(diào)節(jié)的基因。目前已知，IFN-γ刺激后至少有 20 種蛋白被表達，其中 12 種是 IFN-γ刺激后所特有的。這種表達是由于活化特異的 DNA 結(jié)合蛋白使其從胞漿移位到胞核，如干擾素刺激的基因因子 2 (interferon-stimulated gene fac-tor 2, ISGF2)和γ-干擾素激活因子(gamma-interferon activation factor, GAF 或 STAT 91) 結(jié)合到 IFN 基因啟動子中兩個稱之為γ干擾素活化點 (gamma-interferon activation site, GAS)和干擾素刺激的反應元件(interferon-stimulated response element, ISRE)的位置上。IFN-γ主要由活化的 T 細胞和 NK 細胞產(chǎn)生，其生物學作用具有較嚴格的種屬特異性，人 IFN-γ只作用于人或靈長類動物的細胞。在許多病理情況下，IFN-γ作為疾病的標志物的作用已得到證實。病毒感染時，IFN-γ產(chǎn)生。IFN-γ可作為鑒別結(jié)核性與非結(jié)核性腹水的診斷工具。IFN-γ在結(jié)核性腹水中的濃度顯著高于非結(jié)核性腹水，靈敏度和特異性均達到 100％。IFN-γ對多發(fā)性硬化癥的免疫治療的設計及檢測有重要意義。在移植物排斥反應臨床癥狀出現(xiàn)前，IFN-γ的表達量增加；I 型糖尿病的初期，IFN-γ的產(chǎn)生顯著下降。本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法檢測樣品中人IFN-γ 濃度。在人 IFN-γ單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IFN-γ會與其單抗結(jié)合，洗去游離成分；加入生物素化的抗人 IFN-γ抗體，抗人 IFN-γ抗體與結(jié)合在單抗上的人 IFN-γ結(jié)合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IFN-γ，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，人 IFN-γ 濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中人 IFN-γ濃度。
  說明書：UE-H6125S/H6125M/H6125L
  常見問題解答：◆背景信號強是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時間。4.孵育時間過長?？s短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質(zhì)。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。
  ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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