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螞蟻淘/小鼠白細胞介素12 ELISA試劑盒（Mouse IL-12/23(P40) ELISA KIT）/24T/M6142S

價格: ￥952.00 市場價: 1586.67

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貨號: M6142S

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詳情
使用說明
常見問題

- 產品概述：儲存條件 4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。
  組分
  24T
  48T
  96T
  使用方法
  開封后保存條件
  A.標準品
  1000 pg
  1000 pg
  2×1000 pg
  按說明書進行稀釋
  -20℃可存放一月
  B.標準稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  4℃可存放一月
  C.濃縮生物素化抗體（100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  D.生物素化抗體稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  E.濃縮酶結合物（避光100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現(xiàn)配現(xiàn)用）
  F.酶結合物稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  G.濃縮洗滌液（20×）
  16 mL
  16 mL
  25mL
  即用型
  H.顯色劑（避光）
  6 mL
  6 mL
  12mL
  即用型
  I.終止液
  12mL
  12mL
  12mL
  即用型
  4℃或常溫保存
  J.預包被96孔板
  8×3
  8×6
  8×12
  即用型
  密封干燥4℃保存
  K.封板膠紙
  1張
  2張
  4張
  即用型
  注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
  產品介紹 Mouse IL-12/23 (p40) ELISA Kit (Mouse Interleukin-12/23 (p40) Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白細胞介素 12 ELISA 試劑盒，可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-12/23 (p40)濃度。白細胞介素 12，也稱為自然殺傷細胞刺激因子或細胞毒性淋巴細胞成熟因子，是一種多效性細胞因子，主要由活化的巨噬細胞、樹突狀細胞和中性粒細胞產生，有致炎作用和免疫調節(jié)作用。IL-12 的是由二硫鍵相連異源二聚體，70 kDa (p70)的異二聚體糖蛋白由 40 kDa (p40)和 35 kDa (p35)兩個亞基組成。p40 和 p35 亞基沒有 IL-12 的活性，但 p40 同型二聚體可與 IL-12 的受體結合，是 IL-12 的拮抗劑。IL-12 等電點為 pH4.5-5.5。小鼠 IL-12 P35 有 193 個氨基酸殘基，與人 IL-12 P35 有 66％同源性，小鼠 P40 有 313 個氨基酸殘基與人 P40 有 70％同源性。鼠 IL-12 對人類和小鼠細胞均有活性，人IL-12 作用有種屬特異性，人 IL-12 對小鼠細胞作用甚微。IL-12 的生物學功能包括體外效應和體內效應。體外效應：IL-12 能誘導 PHA 刺激的 T 細胞增殖。IL-12 能增加 CD56 ＋NK 細胞的活性；誘導 NK 細胞或 PBMC 增殖和產生 LAK 活性，增加 NK 細胞表達表面分子；促進 NK 細胞產生 IFN-γ 和 TNF-α（TGF-β和 IL-10 抑制該效應）。IL-12 在 BCG 和 LPS 誘導的小鼠炎性休克所致的死亡中起重要作用。IL-12 通過誘導 TNF-α和 IFN-γ，抑制骨髓造血。IL-12 還有抗血管生成作用。體內效應：將 IL-12 輸入動物體內可以增強 NK 細胞的殺傷活性、增加 IFN-γ分泌、啟動造血細胞大量生成、增強異體排斥反應并可能介導抗腫瘤效應。IL-12 在某些 Th1 介導的自身免疫疾病中起重要作用。IL-12 誘導動物脾腫大，其中含有大量造血細胞，紅細胞系、髓樣細胞系和巨核細胞系都增加。IL-2 抑制骨髓造血的作用可能與誘導 NK 細胞產生 IFN-γ等有關。在小鼠腫瘤模型中，IL-12 的抗腫瘤作用依賴 IFN-γ的增加，且與 IL-2、IFN-α以及一些化學治療藥物有協(xié)同抗腫瘤作用。IL-12 發(fā)揮生物學效應所需的細胞因子濃度很低(≤pM)，與合適劑量 IL-2 聯(lián)合應用可降低 IL-2 用量，同時提高 CTL、NK、LAK 的殺傷活性，因此 IL-12 可能成為一種新的抗腫瘤生物制劑。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。在小鼠 IL-12/23 (p40)單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-12/23 (p40)會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體，抗小鼠 IL-12/23 (p40)抗體與結合在單抗上的小鼠 IL-12/23 (p40)結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-12/23 (p40)，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，小鼠 IL-12/23 (p40)濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠 IL-12/23 (p40)濃度。
  說明書：UE-M6142S/M6142M/M6142L
  常見問題解答：◆背景信號強是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數。2.鏈親和素-HRP結合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時間。4.孵育時間過長。縮短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。
  ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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