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螞蟻淘/小鼠白細胞介素1β ELISA試劑盒(Mouse IL-1β ELISA KIT)/96T/M6145L
  • 螞蟻淘/小鼠白細胞介素1β ELISA試劑盒(Mouse IL-1β ELISA KIT)/96T/M6145L

螞蟻淘/小鼠白細胞介素1β ELISA試劑盒(Mouse IL-1β ELISA KIT)/96T/M6145L

價格: ¥2698.00 市場價: 4496.67

貨號: M6145L
品牌: ebiomall
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  • 詳情
  • 使用說明
  • 常見問題
    • 產(chǎn)品概述:儲存條件 4℃避光保存,有效期見外包裝。開封后,保存溫度詳見說明書。

      組分

      24T

      48T

      96T

      使用方法

      開封后保存條件

      A.標(biāo)準(zhǔn)品

      2000 pg

      2000pg

      2×2000 pg

      按說明書進行稀釋

      -20℃可存放一月

      B.標(biāo)準(zhǔn)稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      4℃可存放一月

      C.濃縮生物素化抗體(100×)

      15μL

      30μL

      2×30 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      D.生物素化抗體稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      E.濃縮酶結(jié)合物(避光100×)

      30 μL

      60 μL

      2×60 μL

      按說明書進行稀釋

      (現(xiàn)配現(xiàn)用)

      F.酶結(jié)合物稀釋液

      16 mL

      16 mL

      16 mL

      即用型

      G.濃縮洗滌液(20×)

      16 mL

      16 mL

      25mL

      即用型

      H.顯色劑(避光)

      6 mL

      6 mL

      12mL

      即用型

      I.終止液

      12mL

      12mL

      12mL

      即用型

      4℃或常溫保存

      J.預(yù)包被96孔板

      8×3

      8×6

      8×12

      即用型

      密封干燥4℃保存

      K.封板膠紙

      1張

      2張

      4張

      即用型

      注:終止液和顯色劑具有腐蝕性,一旦接觸到液體,請盡快用大量清水沖洗。

      產(chǎn)品介紹 Mouse IL-1β ELISA Kit (Mouse Interleukin-17A Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ,即小鼠白細胞介素 1β ELISA 試劑盒,可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-1β 濃度。 IL-1 分為 IL-1α、IL-1β兩種,人和小鼠 IL-1 基因定位于 2 號染色體,均含 7 個外顯子。IL-1 前體(ProIL-1)為 31 kDa,通過蛋白水解酶裂解形成成熟的 IL-1 分子。IL-1 在不同種屬中有較高同源性。在氨基酸水平上,IL-1α和 IL-1β在不同種屬同源性分別為 60%-70%和 75%-78%;但在同一種屬中 IL-1α與 IL-1β同源性只有 25%。IL-1α和 IL-1β分子量約 17.5 kDa,等電點分別為 5 和 7,同源性為 28%。IL-1 主要是通過與其受體 (IL-1R) 結(jié)合形成 IL-1 受體復(fù)合物發(fā)揮生物學(xué)作用。T 細胞、成纖維細胞表面 IL-1R 為 80 kDa,而 B 細胞則為 68 kDa,分別稱為 IL-1 RI (CDw 121 a)和 IL-1 RⅡ(CDw 121 b)。IL-1 受體復(fù)合物至少由 IL-1α或 IL-1β,Ⅰ型 IL-1 受體(IL-1RⅠ),IL-1R 輔助蛋白(IL-1 RAcP)三部分組成。這一復(fù)合物介導(dǎo)了 IL-1 的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。IL-1α和 IL-1β是 IL-1 受體激動性配基。IL-1 RAcP 是分子量約為 66 kDa 的多肽。細胞表面單獨存在的 IL-1RⅠ與配體結(jié)合后仍然是不活躍的,只有 IL-1 RAcP 結(jié)合上去后,才能從不活躍狀態(tài)轉(zhuǎn)變成有激活功能的 IL-1 受體復(fù)合物。IL-1 與 IL-1 RtⅡ結(jié)合后易發(fā)生降解,因此被認為是下調(diào)受體。在某些白血病患者血清和尿中以及單核細胞培養(yǎng)上清中發(fā)現(xiàn)一種多肽性質(zhì)的 IL-1 特異性抑制因子,稱為 IL-1 受體拮抗物(interleukin 1 receptor antagonist, IL-1ra), IL-1ra 能特異性地抑制 T 細胞表面 IL-1R 與 IL-1 結(jié)合。IL-1ra 不與 IL-1 直接結(jié)合,而是一種 IL-1 與 IL-1R 相互結(jié)合的競爭性抑制物。IL-1ra 與 IL-1RI 結(jié)合的親和力要高于與 IL-1RⅡ結(jié)合的親和力。IL-1ra、IL-1α、IL-1β與 IL-1RI 結(jié)合的親和力比較相近,但 IL-1ra、IL-1α與 IL-1 RⅡ結(jié)合的親和力要低于 IL-1β 與 IL-1RⅡ結(jié)合的親和力。IL-1β主要由血液中的單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生,星形細胞,少突神經(jīng)膠質(zhì)細胞,腎上腺皮質(zhì)細胞,NK 細胞,內(nèi)皮細胞,角質(zhì)形成細胞,巨核細胞,血小板,神經(jīng)元,中性粒細胞,成骨細胞,許旺細胞,滋養(yǎng)層細胞,T 細胞和成纖維細胞也可產(chǎn)生 IL-1β 。IL-1 具有廣泛的免疫調(diào)節(jié)作用,并有致熱和介導(dǎo)炎癥的作用。 本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IL-1β 濃度。在小鼠 IL-1β 單克隆抗體預(yù)包被酶標(biāo)板中加入適度稀釋的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品,其中的 IL-1β 會與其單抗結(jié)合,洗去游離成分;加入生物素化的抗小鼠 IL-1β 抗體,抗小鼠 IL-1β 抗體與結(jié)合在單抗上的小鼠 IL-1β 結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,洗去游離的成分;加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素,生物素與親合素特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合的酶結(jié)合物;加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有 IL-1β ,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現(xiàn)藍色;加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值,小鼠 IL-1β 濃度與 OD 450 值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中小鼠 IL-1β 濃度。
      說明書:UE-M6145S/M6145M/M6145L
      常見問題解答:◆背景信號強是什么原因?1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌,確保孔區(qū)域洗滌充分;確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液;增加洗滌次數(shù)。2.鏈親和素-HRP結(jié)合物過量。檢查偶聯(lián)物的稀釋度,在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液;延長封閉時間。4.孵育時間過長??s短孵育時間。5.樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中含干擾物質(zhì)。設(shè)置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。

      ◆沒有信號?1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復(fù)實驗;檢查試劑配制方法;復(fù)核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量;增加抗體用量(濃度)。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復(fù)溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用ELISA板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現(xiàn)規(guī)則藍色?1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結(jié)合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預(yù)混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復(fù)使用導(dǎo)致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標(biāo)準(zhǔn)曲線差?1.鏈親和素-HRP結(jié)合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結(jié)合較差。使用酶標(biāo)板,而非組織培養(yǎng)板;使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標(biāo)準(zhǔn)曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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