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螞蟻淘/小鼠白細胞介素8 ELISA試劑盒（Mouse IL-8 ELISA KIT）/48T/M6150M

價格: ￥1587.00 市場價: 2645.00

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貨號: M6150M

品牌: ebiomall

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詳情
使用說明
常見問題

- 產品概述：儲存條件 4℃避光保存，有效期見外包裝。開封后，保存溫度詳見說明書。
  組分
  24T
  48T
  96T
  使用方法
  開封后保存條件
  A.標準品
  1000 pg
  1000 pg
  2×1000 pg
  按說明書進行稀釋
  -20℃可存放一月
  B.標準稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  4℃可存放一月
  C.濃縮生物素化抗體（100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現配現用）
  D.生物素化抗體稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  E.濃縮酶結合物（避光100×）
  30 μL
  60 μL
  2×60 μL
  按說明書進行稀釋
  （現配現用）
  F.酶結合物稀釋液
  16 mL
  16 mL
  16 mL
  即用型
  G.濃縮洗滌液（20×）
  16 mL
  16 mL
  25mL
  即用型
  H.顯色劑（避光）
  6 mL
  6 mL
  12mL
  即用型
  I.終止液
  12mL
  12mL
  12mL
  即用型
  4℃或常溫保存
  J.預包被96孔板
  8×3
  8×6
  8×12
  即用型
  密封干燥4℃保存
  K.封板膠紙
  1張
  2張
  4張
  即用型
  注：終止液和顯色劑具有腐蝕性，一旦接觸到液體，請盡快用大量清水沖洗。
  產品介紹 Mouse IL-8(KC) ELISA Kit (Mouse Interleukin-8 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit) ，即小鼠白細胞介素 8 ELISA 試劑盒，可以定量檢測小鼠血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液等樣本中的天然和重組 IL-8(KC)濃度。小鼠 KC(keratinocyte-derived Cytokine)角化細胞源性細胞因子也稱為 CXCL1 或 N51，最初是從成纖維細胞中作為 PDGF 誘導的即早基因(Immediate early gene)被鑒定出，其編碼一個約 8 kDa 的分泌蛋白。根據小鼠 KC 的蛋白質序列，其屬于 alpha（CXC）趨化因子家族。除有絲分裂原活化的成纖維細胞外，KC 還能在細菌或 LPS 刺激的腹膜及肺巨噬細胞、內皮細胞、血管平滑肌細胞上誘導表達。研究表明糖皮質激素可抑制有絲分裂原對 KC 的誘導表達。小鼠 KC 的 cDNA 編碼 96 個氨基酸殘基的前體蛋白，N 末端 19 個氨基酸殘基經剪切產生 77 個氨基酸殘基的成熟 KC 蛋白。小鼠 KC 的蛋白序列與另一個 alpha 趨化因子 MIP-2 具有 63%的序列同一性。與其他 alpha 趨化因子類似，小鼠 KC 是中性粒細胞的強誘導劑和激活劑。小鼠 KC 和 MIP-2 的生物學活性是通過獨特的小鼠 IL-8 受體來介導的。小鼠 IL-8R 與人 IL-8R?和 IL-8Rα分別具有 71%和 68%的序列同一性。由于在小鼠中還沒有鑒定到 IL-8 同源物，所以 MIP-2 和 KC 被認為在功能上與 IL-8 相似，在小鼠中作為主要的促炎癥反應 alpha-趨化因子。本試劑盒采用雙抗體夾心 ELISA 法檢測樣品中小鼠 IL-8(KC)濃度。在小鼠 IL-8(KC)單克隆抗體預包被酶標板中加入適度稀釋的樣品和標準品，其中的 IL-8(KC)會與其單抗結合，洗去游離成分；加入生物素化的抗小鼠 IL-8(KC)抗體，抗小鼠 IL-8(KC)抗體與結合在單抗上的小鼠 IL-8(KC)結合而形成免疫復合物，洗去游離的成分；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，生物素與親合素特異性結合，洗去未結合的酶結合物；加入顯色劑，若反應孔中有 IL-8(KC)，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑出現藍色；加終止液變?yōu)辄S色。在 450 nm 下測 OD 值，小鼠 IL-8(KC)濃度與 OD 450 值之間呈正比，可通過繪制標準曲線計算出樣品中小鼠 IL-8(KC)濃度。
  說明書：UE-M6150S/M6150M/M6150L
  常見問題解答：◆背景信號強是什么原因？1.洗板不充分。將洗滌緩沖液加入孔中洗滌，確?？讌^(qū)域洗滌充分；確保已在洗滌前棄去所有殘留抗體溶液；增加洗滌次數。2.鏈親和素-HRP結合物過量。檢查偶聯物的稀釋度，在推薦的稀釋度下使用。3.封閉不充分。檢查封閉液；延長封閉時間。4.孵育時間過長。縮短孵育時間。5.樣品或標準品中含干擾物質。設置對照。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。
  ◆沒有信號？1.試劑添加順序錯誤或試劑配制不正確。重復實驗；檢查試劑配制方法；復核試驗試劑添加流程。2.HRP被疊氮化合物污染。使用新鮮配制的試劑。3.抗體用量不足。檢查是否使用了推薦的抗體量；增加抗體用量（濃度）。4.使用了含胎牛血清的緩沖液復溶抗體。檢查使用的試劑。5.捕獲抗體與板結合較差。使用ELISA板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。6.緩沖液受污染。新鮮配置緩沖液。◆整塊板呈現規(guī)則藍色？1.洗板不充分或跳過洗滌步驟未去除殘留的非結合過氧化物酶。嚴格按照說明書洗滌流程操作。2.底物溶液預混太早不新鮮。底物溶液混合后須立即使用。3.封板膠紙或試劑儲液槽重復使用導致HRP殘留污染。每步均需使用新的封板膠紙或試劑儲液槽。4.緩沖液有金屬或HRP污染。新鮮配置緩沖液。◆標準曲線差？1.鏈親和素-HRP結合物量不足。檢查倍性稀釋是否正確。2.捕獲抗體與板結合較差。使用酶標板，而非組織培養(yǎng)板；使用不含其他雜蛋白的PBS溶解抗體。3.檢測抗體量不足。檢查稀釋度是否正確。4.孵育時間不足。延長底物溶液孵育時間。5.實驗操作流程有誤。嚴格按照說明書操作流程。6.標準曲線稀釋計算錯誤。重新計算制作新的標準曲線。
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