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NEB/Lambda Protein Phosphatase (Lambda PP)/P0753S/100,000 units
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NEB/Lambda Protein Phosphatase (Lambda PP)/P0753S/100,000 units

價(jià)格: ¥6432.00 市場(chǎng)價(jià): 10720.00

貨號(hào): P0753S-100,000units
品牌: NEB
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    • Description:

      LamBDaProteinPhosphatase(LambdaPP)isaMn2+-dependentproteinphosphatasewithactivitytowardsphosphorylatedserine,threonineandtyrosineresidues.Itisthe221amino-acidproductoftheORF221openreADIngframeonbacteriophagelambda(1,2).


      Highlights

    • DualSpecificity:proteinserine/threonine/tyrosinephosphatase?
    • Bacteriophagelambda,recombinant(E.coli)
    • ProductSource

      Isolatedfromastrainof?E.coli?thatcarriesthebacteriophagelambdaORF221openreadingframeunderthecontrolofaT7expressionsystem(kindlyprovidedbyDr.D.Barford)(2).

      ReagentsSupplied

      Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:

      Storeat(°C)Concentration
      NEBufferforPMP-2010X
      MnCl2-2010mM

      Notes:

      ThefollowinginformationcanbeusedassuggestedinitialconditionsfordephosphorylationofproteinswithLambdaPP.100unitsofLambdaPPremove~100%ofphosphates(0.5nmol)inphosphorylatedmyelinbasicprotein(phospho-MyBP,18.5kDa)in30minutesina50?μlreaction.Theconcentrationofphospho-MyBPis10μMwithrespecttophosphate.TheProteinSerine/threoninePhosphatase(PSP)activityofLambdaPPisassessedonMyBPphosphorylatedexclusivelyonserine/threonineresidueswithcAMP-dependentProteinKinase.TheProteinTyrosinePhosphatase(PTP)activityisassessedonMyBPphosphorylatedexclusivelyontyrosineresidueswithAblProteinTyrosineKinase.LambdaPPisactiveonphosphorylatedhistidineresidues(2).0ptimalincubationtimesandenzymeconcentrationsmustbedeterminedempiricallyforeachparticularsubstrate.?Ifthesourceofphosphorylatedproteinisacrudeextractofcellsortissue,itisveryimportanttoincludetheappropriateproteaseinhibitorsinthelysisbufferandtouseshorterincubationtimefordephosphorylation.ThefollowinglevelsofinhibitionofLambdaPP(100units)arefoundwhenthereactionbufferandMnCl2aresupplementedwith:?10mMSodiumOrthovanadate(3):80%?10mMSodiumOrthovanadate,50mMSodiumFluoride:90%50mMEDTA:95%?1%TritonX-100:no?0.4%NonidetP-40:no?0.025%Tween20:no?0.5MNaCl:5%?ATPMix(10mMMgCl2,0.1mMATP):noProteaseInhibitorCocktail*:10%?*PepstatinA,leupeptinandaprotinin,10μg/mleach,0.5mMPMSFand1mMbenzamidine
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