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螞蟻淘/Renilla Luciferase Assay Kit（海腎螢光素酶報告基因檢測試劑盒）/1000T/R6073L
  • 螞蟻淘/Renilla Luciferase Assay Kit（海腎螢光素酶報告基因檢測試劑盒）/1000T/R6073L

螞蟻淘/Renilla Luciferase Assay Kit（海腎螢光素酶報告基因檢測試劑盒）/1000T/R6073L

價格: ￥5526.00 市場價: 9210.00
貨號: R6073L
品牌: ebiomall
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    • 產品概述：產品內容 組分R6073S（20T）R6073M（200T）R6073L（1000T）A. 5×Renilla Luciferase Lysis Buffer5 mL20 mL100 mLB. Renilla Luciferase Assay Buffer5 mL20 mL100 mLC. 50×Coelenterazine100 μL400 μL2 × 1 mL儲存條件 -80℃保存。海腎螢光素酶工作液（B+C）混合液應新鮮配制，當天使用。有效期見外包裝。 產品介紹真核基因表達調控研究常用的方法是進行報告基因的檢測，生物發(fā)光法又是報告基因檢測最常用的有效手段。螢光素酶能催化底物螢光素的轉化，并發(fā)射出光子。該產品為海腎螢光素酶報告基因在哺乳動物細胞中的表達提供快速、靈敏、穩(wěn)定的檢測方法。

      產品特點 1. 快速：細胞裂解在 10-15 min 內完成。 2. 方便：試劑易于配制，樣品檢測步驟簡單。
      說明書：UE-R6073S/R6073M/R6073L
      常見問題解答：◆檢測的螢光數值很低怎么辦？

      （1）可能為轉染效率低a.優(yōu)化轉染實驗條件，用較易轉染的質粒做陽性對照（如轉染過表達熒光蛋白質粒）；b.確保轉染DNA的質量，可通過酶切或瓊脂糖凝膠電泳的方法對DNA質量進行鑒定；c.選擇活性較高，處于指數分裂期的細胞進行轉染。（2）可能為啟動子活性低或誘導失敗a.轉染后的細胞培養(yǎng)使用特異性誘導啟動子的條件；b.優(yōu)化細胞的培養(yǎng)條件，提高螢光素酶的表達量；c.更換強啟動子（如SV40、CMV）。注：海腎螢光素酶基因作為內對照，其表達應不受時期、部位、環(huán)境影響，因此常用組成型表達的TK啟動子。（3）樣品裂解效率低a.細胞培養(yǎng)時間不宜過長，12-36h內最好，長時間培養(yǎng)后，細胞可能會難裂解。b.加入的裂解液需足量，保證細胞能夠充分裂解。（4）檢測過程操作不規(guī)范a.選擇合適的檢測儀器，能夠檢測化學發(fā)光或者生物發(fā)光的儀器都適用于該實驗；b.需加入足量底物，保證底物的飽和，否則會造成檢測結果出現很大偏差；c.室溫反應。反應時各個組分（細胞裂解產物，底物工作液等）都需要調整到室溫；d.螢光素酶的半衰期一般約30min，加完底物后可立即檢測，盡量在30min內完成。（5）底物氧化失效a.底物避光密封保存，螢火蟲螢光素酶底物-20℃保存；海腎螢光素酶底物推薦-80℃保存；b.反應工作液建議現用現配。◆進行檢測的過程中，螢光信號值太高該如何進行調整？（1） 減少質粒轉染量。（2）細胞樣品裂解后，離心取上清后檢測或對裂解產物進行稀釋后檢測。注：不建議通過減少底物量來降低熒光值，需要保證底物的飽和來反映螢光素酶真實的表達水平，否則會造成檢測結果出現大的偏差。
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